二六〇年余り続いた江戸時代が終焉を迎え、明治という新たな時代が幕を開け始める。しかし、そこには士道を貫かんと、身命を賭して戦い続ける男たちがいた。薩長土を中心とした新政府軍と、徳川家臣を中心とした旧幕府軍との熾烈な争い--戊辰戦争に身を投じていく新選組。自らの宿命に手繰り寄せられるように、彼らは苛烈な道へ歩を進めていく。【以上、Dアニメストア番組広報資料より引用】第１回に先だって前週に前作の総集編が特別編として放送された。【役名（声の演技者）】雪村千鶴（桑島法子）、土方歳三（三木眞一郎）、沖田総司（森久保祥太郎）、斎藤 一（鳥海浩輔）、藤堂平助（吉野裕行）、原田左之助（遊佐浩二）、近藤 勇（大川透）、山南敬助（飛田展男）、永倉新八（坪井智浩）、島田 魁（大羽武士）、榎本武揚（伊藤栄次）、大鳥圭介（内匠靖明）、風間千景（津田健次郎）、天霧九寿（山口りゅう）、不知火 匡（吉田裕秋）、南雲 薫（伊藤葉純）、雪村綱道（斎藤龍吾）。